Первоначально маршрут функционировал без номера и назывался просто «Москва–Зеленоград». Идея его создания возникла из острой потребности соединить Зеленоград с Москвой регулярным транспортным сообщением. Маршрут начал свою работу в период активной застройки города, когда остро ощущалась нехватка транспортных связей с внешним миром. Жители нуждались в быстром и надежном средстве перемещения, и решением проблемы стал автобус №400. Поездка на маршруте от Зеленограда до Москвы занимала около 35 минут — беспрецедентно короткий промежуток времени для расстояний того периода.

Из воспоминаний жителя Зеленограда Валерия Григорьевича Бородая о маршруте №400: «Виктор Яковлевич Певзнер [директор автокомбината] организовал маршрут №400. Этот автобус был очень желанный для пассажиров, во-первых, он был в центре города, не надо было электричку ждать, толкаться. Во-вторых, билет стоил всего 35 копеек. Ходил он от площади Юности, по городу автобус делал несколько остановок – на улице Студенческой [имеется в виду остановка «Студенческая» на улице Юности], у кинотеатра «Эра» и Московском проспекте, где кондукторы обилечивали.

При посадке в автобус была строгая очередь: одна очередь для сидячих пассажиров, а вторая для тех, кто ехал стоя. Автобусы ходили попарно или по три сразу в часы пик с интервалом 10 минут. Мало того, все старались попасть во "Львовский" автобус, потому что он был очень теплый. А кроме "Львовских" были обыкновенные автобусы, ЛиАЗ – мы их называли "скотовозы", они были холодные. А Львовский автобус — он мягкий, быстро ездил, у него мотор сзади, в салоне не так слышно.

Автобус шел до Речного вокзала без остановок. И так же обратно. Но в перестроечное время, когда многие работали на Сходне, в Черной грязи, остановки были "по требованию". Или подходили к водителю, давали ему несколько копеечек, и он останавливался. Первый автобус выходил около 5 утра. Очень много ребят ездили с папами и с мамами в московские музеи, театры, парки, спортивные комплексы, было очень удобно».

Путешествие на 400-м автобусе превратилось в своеобразный ритуал для каждого жителя Зеленограда. На протяжении шести десятилетий пассажиры, пользующиеся данным маршрутом, сталкивались с различными сложностями, обусловленными техническими особенностями разных типов автобусов: начиная от знаменитых ЛиАЗ-677 с их узкими и некомфортными салонами, заканчивая «Львовскими» автобусами, которые хотя и являлись лучшим вариантом, все-таки не могли гарантировать идеальный комфорт. Венгерские «Икарусы», появившиеся позже, обеспечивали больше пространства и комфорта, но также не избавили пассажиров от шума двигателей и сильной вибрации кузова. Проблемы усугубляла перегруженность маршрута в часы пик, длинные очереди на посадку и борьба за свободное место. Такие обстоятельства закрепили за маршрутом имидж сложного испытания, но вместе с тем породили неповторимую атмосферу единения и взаимовыручки среди постоянных пользователей маршрута.

С течением времени ситуация начала меняться. Появление современных моделей автобусов существенно повысило уровень комфорта для пассажиров. С 2018 года автобус №400 расширился до сети из четырех маршрутов, которые сегодня соединяют Зеленоград с разными станциями московского метро: 400Э (экспресс) — с «Ховрино» (ныне — автобус Е41), 400 (поостановочный) — с «Речным вокзалом», 400Т — с «Тушинской» и 400К — со «Сходненской».

Появившись 60 лет назад, маршрут №400 занял особое место в народной культуре Зеленограда. В памяти поколений сохранились многочисленные байки и анекдоты, посвященные автобусу. Самостоятельно родились стихи и песни, воспевающие этот маршрут и отражающие повседневную жизнь зеленоградцев. И сейчас эмоциональная привязанность зеленоградцев к историческому маршруту остается неизменной, а сами четырехсотые автобусы продолжают оставаться важной артерией, обеспечивающей связь между Зеленоградом и столицей.